Препаративная ВЭЖХ система для очистки РНК

Терапевтический потенциал мРНК широко обсуждается во времена поиска вакцин при исследовании COVID-19. Идея состоит в том, чтобы обеспечить человеческий организм мРНК, кодирующей терапевтические белки, которые иммунная система использует для борьбы с вирусом.

РНК может быть произведена и применена намного проще по сравнению с полноразмерными терапевтическими белками, которые она кодирует. Было обнаружено, что для получения чистой мРНК для введения очень важна очистка хроматографическими средствами.

Ключевым моментом для РНК-хроматографии является схема системы ВЭЖХ. Очень важно, чтобы хроматография проводилась при повышенных температурах, чтобы денатурировать саму РНК и, следовательно, упростить ее структурное разнообразие и обеспечить успешную очистку. Повышенная температура в сочетании с бинарным градиентом между ацетонитрилом и водой, как это делается в методе обращенно-фазовой хроматографии, будет эффективно разделять, а также инактивировать и разворачивать РНКазу.

Специальный очиститель РНК – это специально разработанная система для очистки РНК. Он состоит из трехкомпонентного системного насоса низкого давления, который не только обеспечивает надежное формирование бинарного градиента между водой, включая 1,0 M TEAA (pH 7) и ацетонитрил, но также позволяет напрямую наносить образец большого объема на колонку с помощью насос системы через отдельный входной порт для пробы. Диапазон расхода этого насоса составляет от 10 до 80 мл / мин. Впрыск пробы через пробоотборник или Variloop возможен с помощью встроенного впрыскивающего клапана. После клапана впрыска растворитель, а также образец нагреваются нагревателем элюента, а затем наносятся на колонку, которая дополнительно нагревается нагревательной муфтой для обеспечения идеальных условий термической очистки. Идентификация продукта осуществляется детектором с переменной длиной волны 260 нм или длиной волны по вашему выбору. После очистки фракционирование осуществляется клапаном фракционирования.